你知道原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)主要區(qū)別是什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！

一、原代培養(yǎng)

原代培養(yǎng)即第一次培養(yǎng)，是指將培養(yǎng)物放置在體外生長(zhǎng)環(huán)境中持續(xù)培養(yǎng)，中途不分割培養(yǎng)物的培養(yǎng)過(guò)程。有幾方面含義：

1.養(yǎng)物一經(jīng)接種到培養(yǎng)器皿（瓶）中就不再分割，任其生長(zhǎng)繁殖；

2.原代培養(yǎng)中的“代"并非細(xì)胞的“代"數(shù)，因?yàn)榕囵B(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞經(jīng)多次分裂已經(jīng)產(chǎn)生多代子細(xì)胞；

3.原代培養(yǎng)過(guò)程中不分割培養(yǎng)物不等于不更換培養(yǎng)液，也不等于不更換培養(yǎng)器皿。

正常細(xì)胞培養(yǎng)的世代數(shù)有限，只有癌細(xì)胞和發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞才能無(wú)限生長(zhǎng)下去。所謂轉(zhuǎn)化即是指正常細(xì)胞在某種因子的作用下發(fā)生突變而具有癌性的細(xì)胞。世界上許多實(shí)驗(yàn)室所廣泛傳用的HeLa細(xì)胞系就是1951年從一位名叫Henrietta Lacks的婦女身上取下的宮頸癌細(xì)胞培養(yǎng)而成。此細(xì)胞系一直延用至今。原代培養(yǎng)是建立各種細(xì)胞系（株）必經(jīng)的階段，其是否成功與組織污染與否、供體年齡、培養(yǎng)技術(shù)和方法、適宜培養(yǎng)基的選擇等多種因素有關(guān)。由于原代培養(yǎng)的細(xì)胞轉(zhuǎn)化性極小，對(duì)病毒敏感性好，因此適應(yīng)制備疫苗等生物制品；但也存在有潛在外源因子、不能事先檢查標(biāo)本、且受供體年齡健康狀況的影響而導(dǎo)致批間差異大等缺陷。常用的原代細(xì)胞培養(yǎng)有雞胚成纖維細(xì)胞及豬腎、猴腎、地鼠腎等原代細(xì)胞。

原代培養(yǎng)的基本過(guò)程包括取材、培養(yǎng)材料的制備、接種、加培養(yǎng)液、置培養(yǎng)條件下培養(yǎng)等步驟，在所有的操作過(guò)程中，都必須保持培養(yǎng)物及生長(zhǎng)環(huán)境的無(wú)菌。

多數(shù)情況下，分散的細(xì)胞若屬于貼壁依賴(lài)型細(xì)胞，就能黏附、鋪展于培養(yǎng)器皿和載體表面生長(zhǎng)而形成細(xì)胞單層，這種培養(yǎng)方式稱(chēng)為單層細(xì)胞培養(yǎng)（monolayerculture），又叫貼壁培養(yǎng)（adherentculture）。少數(shù)情況下，培養(yǎng)的細(xì)胞沒(méi)有貼壁依賴(lài)性，可通過(guò)專(zhuān)門(mén)設(shè)備使細(xì)胞始終處于懸狀態(tài)而在體外生長(zhǎng)，這種形式稱(chēng)為懸浮培養(yǎng)（suspensionculture）。如何讓接種的細(xì)胞盡快貼壁，是決定培養(yǎng)成功的關(guān)鍵步驟：

1.取決于適當(dāng)?shù)纳L(zhǎng)基質(zhì)表面；

2.可降低接種后培養(yǎng)液對(duì)細(xì)胞的浮力，如先少補(bǔ)加少量培養(yǎng)液，待細(xì)胞貼壁后再補(bǔ)足營(yíng)養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；

3.注意適當(dāng)?shù)募?xì)胞接種密度，一般105個(gè)/ml左右。

體外培養(yǎng)技術(shù)中所謂的傳“代"概念并不等于細(xì)胞生物學(xué)中“親代細(xì)胞"與“子代細(xì)胞"中“代"的概念。傳代培養(yǎng)的實(shí)質(zhì)就是分割后再一次培養(yǎng)，可以相對(duì)地衡量培養(yǎng)物的培養(yǎng)年齡。

二、傳代培養(yǎng)

傳代培養(yǎng)是組織培養(yǎng)常規(guī)保種方法之一。也是幾乎所有細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。當(dāng)細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中長(zhǎng)滿(mǎn)后就需要將其稀釋分種成多瓶，細(xì)胞才能繼續(xù)生長(zhǎng)。這一過(guò)程就叫傳代。傳代培養(yǎng)可獲得大量細(xì)胞供實(shí)驗(yàn)所需。傳代要在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下進(jìn)行，每一步都需要認(rèn)真仔細(xì)的無(wú)菌操作。

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