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磁珠法核酸提取過程中的常見誤區(qū)有哪些？

磁珠法核酸提取是傳統(tǒng)DNA提取方法wu法比擬的，那么在磁珠法核酸提取過程中的常見誤區(qū)有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、磁珠越多，提取效果越好磁珠的主要特點是既可以分散于液體中，也可以在外加磁場作用下以固態(tài)方式和液相分li任何試劑體系，磁珠和液體的比例都應(yīng)該是有一定閾值的，超過一定的比例，過多的磁珠將因為無法均勻分散于液體中，而喪失其分散的特性，也使得洗滌過程中無法充分增加核酸磁珠和液體接觸的效率。而過量的磁珠也會吸附更多的雜質(zhì)，對于除雜的效果影響非常大。甚至有些時候，過多的磁...

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蛋白質(zhì)提純的注意事項和常見問題有什么？

在進(jìn)行任何一種蛋白質(zhì)純化的時候，都要時刻注意維護(hù)它的穩(wěn)定性，保護(hù)它的活性，那么你知道蛋白質(zhì)提純的注意事項和常見問題有什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、注意事項：1、操作盡可能置于冰上或者在冷庫內(nèi)進(jìn)行。2、濃度不要太稀，蛋白濃度維持在μg/mL～mg/mL。3、選擇合適的pH，除非是進(jìn)行聚焦層析，所使用的緩沖溶液pH避免與pI相同，防止蛋白質(zhì)的沉淀。4、使用蛋白酶抑制劑，防止蛋白酶對目標(biāo)蛋白的降解；在純化細(xì)胞中的蛋白質(zhì)時，加入DNA酶，降解DNA，防止DNA對蛋白的污染。5、避免...

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你知道WB實驗操作步驟有哪幾步嗎？

蛋白質(zhì)印跡(Westernblotting)：又稱為免疫印跡，根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合，半定量檢測樣品中的某種蛋白的方法。基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細(xì)胞或生物組織樣品進(jìn)行著色。通過分析條帶的位置和條帶深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中表達(dá)情況。那么你知道WB實驗操作步驟有哪幾步嗎？讓我們一起來看看吧！一、樣本制備蛋白提取1.前期準(zhǔn)備：首先要了解你所研究蛋白的內(nèi)源表達(dá)水平，常用的數(shù)據(jù)庫如Uniport、Atlas、BioGPS，或查閱相關(guān)文獻(xiàn)。設(shè)置陽性對照...

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細(xì)胞培養(yǎng)基的滅菌及儲存方法有哪些？

不同的培養(yǎng)基由于其營養(yǎng)成份不同，滅菌方式和儲存方法也可能不同。那么細(xì)胞培養(yǎng)基的滅菌及儲存方法有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、不同細(xì)胞培養(yǎng)基的除菌方式及注意事項某些培養(yǎng)基（如MEM）可進(jìn)行高壓滅菌，這類培養(yǎng)基一般不含有L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉，一般是在培養(yǎng)基高壓滅菌后才加入。另外可用耐高壓的谷氨酸鹽（如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）代替L-谷氨酰胺。可高壓滅菌的培養(yǎng)基在121℃、15psi，15分鐘的條件下wan全可達(dá)到滅菌效果及營養(yǎng)成分的最小損失，不需將滅菌時間延長。絕大多數(shù)細(xì)胞...

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細(xì)胞培養(yǎng)基的理化性質(zhì)有什么？

動物細(xì)胞在細(xì)胞培養(yǎng)基中不僅能存活，還要分裂增殖，合適的滲透壓、pH值等理化性質(zhì)是細(xì)胞培養(yǎng)基必須具備的前提條件。那么細(xì)胞培養(yǎng)基的理化性質(zhì)有什么呢？讓我們一起來看看吧！一、pH動物細(xì)胞大多數(shù)需要輕微的堿性條件，適宜pH在7.2～7.4之間。細(xì)胞培養(yǎng)基的pH值通常需經(jīng)校正的pH計來測定。在細(xì)胞生長過程中，隨細(xì)胞數(shù)量的增多和代謝活動的加強(qiáng)，二氧化碳不斷被釋放，培養(yǎng)液變酸，pH值發(fā)生變化。酚紅是細(xì)胞培養(yǎng)基中常用的pH指示劑，但依靠細(xì)胞培養(yǎng)基中的酚紅等pH指示劑進(jìn)行判斷，需要實驗員的經(jīng)驗...

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