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腫瘤組織的原代細胞培養(yǎng)有哪些注意事項？

原代培養(yǎng)是直接從生物體組織或器官的一部分進行培養(yǎng)，也稱初代培養(yǎng)。腫瘤組織的原代細胞培養(yǎng)技術為腫瘤研究及治療提供充足的細胞來源是癌癥在體外研究的重要工具，與體內(nèi)研究相輔相成。但目前腫瘤細胞原代培養(yǎng)成功率不高的許多問題還需繼續(xù)探討與研究。腫瘤組織的原代細胞培養(yǎng)有哪些注意事項？讓我們一起來看看吧！注意點一：取材部位的選擇非常重要，應在癌細胞集中、細胞活力較好的部位取材，盡量避免在壞死區(qū)取材；注意點二：取材后應盡快培養(yǎng)，最好不要超過24h，如需耽擱時間，可將組織塊于培養(yǎng)液中浸泡，放置...

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核酸提取(磁珠法)常見的六大問題

核酸提取的方法很多，如煮沸裂解法、酚氯仿抽法、濃鹽法、陰離子去污劑法、異硫氰酸胍/苯酚法（Trizol法）、CTAB法原理（植物DNA提取經(jīng)典方法）、離心柱純化、磁珠法提取等，今天我們來看看核酸提取(磁珠法)常見的六大問題，從而更好的了解磁珠法提取核酸。Q：是不是誤區(qū)越多，提取效果越好？A：不是，磁珠的主要特點是既可以分散于液體中，也可以在外加磁場作用下以固態(tài)方式和液相分離，ren何試劑體系，磁珠和液體的比例都應該是有一定閾值的，超過一定的比例，過多的磁珠將因為無法均勻分散于...

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Elisa的檢測方法有哪些？

酶聯(lián)免疫吸附測定（enzymelinkedimmunosorbentassay，簡寫ELISA或ELASA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結(jié)合進行免疫反應的定性和定量檢測方法。Elisa的檢測方法有哪些？讓我們一起來看看吧！常見的有直接法、間接法、競爭法基雙抗夾心法，其中直接法和競爭法應用較少，應有最多的是雙抗夾心法，讓我們一一來看看它們是如何操作的吧！一、直接法將抗原固定于ELISA班上，然后用酶標抗體直檢測抗原。相較于其他類型的ELI...

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如何利用流式進行細胞凋亡（Cell Apoptosis）分析

磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine,PS)是一種細胞膜活性物質(zhì)，正常細胞中，其位于細胞膜脂質(zhì)雙層內(nèi)側(cè),在細胞凋亡的早期，PS可從細胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細胞膜的表面。凋亡早期：磷脂膜(PS)外翻，但是細胞膜保持完整性，因此PI（與DNA結(jié)合）染色為陰性。AnnexinV是一種磷脂結(jié)合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，可以與凋亡早期外翻的磷脂膜(PS)結(jié)合。凋亡中晚期：磷脂膜(PS)外翻，但是細胞膜被破壞，AnnexinV和PI分別與磷脂酰絲氨酸和DNA結(jié)合。壞死細胞...

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Lipo3000細胞轉(zhuǎn)染的實驗步驟及注意事項

細胞轉(zhuǎn)染常用的轉(zhuǎn)染試劑很多，其中，Lipo3000深受廣大科研工作者的喜愛，那我們來看看Lipo3000細胞轉(zhuǎn)染的實驗步驟及注意事項吧！一、實驗前準備Lipofectamine™3000轉(zhuǎn)染試劑（ThermoFisher）、Opti-MEM（可以用無血清的培養(yǎng)基代替）二、實驗步驟1.接種細胞，使其在轉(zhuǎn)染時達到70–90%匯合度。注：對于HEK293，6孔板一般鋪50萬個細胞左右。對于PC9,24孔板一般鋪5-10萬個細胞。由于不同細胞，生長狀況不太一樣，需要根據(jù)情...

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